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he染色在医学上代表什么(he染色方法)

导读 您好,今天芳芳来为大家解答以上的问题。he染色在医学上代表什么,he染色方法相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、一、实验

您好,今天芳芳来为大家解答以上的问题。he染色在医学上代表什么,he染色方法相信很多小伙伴还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、一、实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。

2、(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。

3、(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。

4、(4)分色:镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤。

5、(5)染胞质:浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤。

6、(6)吹干或自然晾干细胞 爬片后,中性树胶封片。

7、若细胞用4%多聚甲醛固定,则染色时间相应延长,苏木素染色12-15min,伊红5min即可。

8、二、注意事项:染色时调节pH值很重要。

9、如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。

10、因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。

11、染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

12、 2、切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。

13、如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。

14、 3、切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。

15、 4、在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。

16、5、切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

17、6、最后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。

18、扩展资料一、细胞核染色原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。

19、细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外。

20、使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。

21、苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。

22、二、细胞浆染色原理:细胞浆内主要成分是蛋白质,为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系,当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时,胞浆对外不显电性,此时酸或碱性染料不易染色。

23、当pH调到6.7-6.8时,大于蛋白质的等电点pH值,表现酸性电离,而带负电荷的阴离子,可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。

24、因此必须把pH调至胞浆等电点以下,在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子),就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。

25、伊红Y是一种化学合成的酸性染料,在水中离解成带负电荷的阴离子,与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色,细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织,嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色,与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。

26、参考资料来源:百度百科-he染色。

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