sirna作用（siRNA是什么）

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1、Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。

2、SiRNA是siRISC的主要成员，激发与之互补的目标mRNA的沉默。

3、siRNA原理: RNA干涉(RNAi)在实验室中是一种强大的实验工具，利用具有同源性的双链RNA(dsRNA)诱导序列特异的目标基因的沉寂，迅速阻断基因活性。

4、siRNA在RNA沉寂通道中起中心作用，是对特定信使RNA(mRNA)进行降解的指导要素。

5、siRNA是RNAi途径中的中间产物，是RNAi发挥效应所必需的因子。

6、siRNA的形成主要由Dicer和Rde-1调控完成。

7、由于RNA 病毒入侵、转座子转录、基因组中反向重复序列转录等原因,细胞中出现了dsRNA，Rde-1(RNAi缺陷基因-1)编码的蛋白质识别外源dsRNA，当dsRNA达到一定量的时候，Rde-1引导dsRNA与Rde-1编码的Dicer(Dicer是一种RNaseIII 活性核酸内切酶，具有四个结构域:Argonaute家族的PAZ结构域，III型RNA酶活性区域，dsRNA结合区域以及DEAH/DEXHRNA解旋酶活性区)结合，形成酶-dsRNA复合体。

8、在Dicer酶的作用下，细胞中的单链靶mRNA(与dsRNA具有同源序列)与dsRNA的正义链互换，原来dsRNA中的正义链被mRNA代替而从酶-dsRNA复合物中释放出来，然后，在ATP的参与下，细胞中存在的一种RNA诱导的沉默复合体RNA-induced silencing complex (RISC，由核酸内切酶、核酸外切酶、解旋酶等构成，作用是对靶mRNA进行识别和切割)利用结合在其上的核酸内切酶的活性来切割dsRNA上处于原来正义链位置的靶mRNA分子中与dsRNA反义链互补的区域，形成21-23nt的dsRNA小片段，这些小片段即为siRNA。

9、RNAi干涉的关键步骤是组装RISC和合成介导特异性反应的siRNA蛋白。

10、siRNA并入RISC中，然后与靶标基因编码区或UTR区完全配对，降解靶标基因，因此说siRNA只降解与其序列互补配对的mRNA。

11、其调控的机制是通过互补配对而沉默相应靶位基因的表达，所以是一种典型的负调控机制。

12、siRNA识别靶序列是有高度特异性的，因为降解首先在相对于siRNA来说的中央位置发生，所以这些中央的碱基位点就显得极为重要，一旦发生错配就会严重抑制RNAi的效应。

13、 siRNA有如下特点: 1. 长度约在22nt左右。

14、2. 依赖Dicer酶的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer产物的特点。

15、 3. 生成需要Argonaute家族蛋白存在。

16、 4. 是RISC组分。

17、 5. siRNA合成是由双链的RNA或RNA前体形成的。

18、6. siRNA是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物。

19、 7. 结构上， siRNA是双链RNA。

20、 8. 在Dicer酶的加工过程中， siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。

21、 9. 在作用位置上， siRNA可作用于mRNA的任何部位。

22、 10. 在作用方式上， siRNA只能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。

23、11.。

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